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植物6-苄氨基喋呤(6BA)检测试剂盒简介!
更新时间:2017-12-11   点击次数:1198次

植物6-苄氨基喋呤(6BA)检测试剂盒简介!

检测目的

本试剂盒用于测定植物血清、血浆及相关液体样本中6-苄氨基喋呤(6BA)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物6-苄氨基喋呤(6BA)水平。用纯化 的植物6-苄氨基喋呤(6BA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中 依次加入6-苄氨基喋呤(6BA),再与 HRP 标记的6-苄氨基喋呤(6BA)抗 体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的6-苄氨基喋呤(6BA)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标 准曲线计算样品中植物6-苄氨基喋呤(6BA)浓度。

ELISA 的样本实验准备

在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

植物6-苄氨基喋呤(6BA)检测试剂盒简介!

  • 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  • 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
  • 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
  • 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
  • 培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  • 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  • 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
  • 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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  • 注意事项

     

  • 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。

  • 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  • 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD  大于标准品孔*孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  • 5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  • 6.底物请避光保存。

  • 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

  • 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

  • 9.本试剂不同批号组分不得混用。

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