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测定意义：
 

氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合
物，其中包括MDA。通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
 

测定原理：
 

MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在532nm 有zui大吸收
峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm
与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的含量。
 

需自备的仪器和用品：
 

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、
研钵、冰和蒸馏水。
 

试剂的组成和配置：
 

提取液：液体100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体30mL×1 瓶，4℃保存；

MDA 提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提
取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，
加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测

注意事项：
 

临用前注意试剂一是否*溶解，如未溶解，可以70℃-90℃加热，并振荡以促进溶解。

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