磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)产品简介

产品简介：
血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在在丌同的 pH 环境下能快速相互转换。在 pH7.4 血清中，二者浓度比例为 1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为 1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为 1:9；在 pH4.5尿液中浓度比例为100:1。WHO 推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。 

无机磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)是先经硫酸亚铁提纯蛋白，利用无机
磷不钼酸铵结合生成磷钼酸铵，后者被硫酸亚铁还原成蓝紫色的复合物，通过酶标仪检测
640nm 处吸光度值，根据公式计算出无机磷含量。本试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临
床诊断戒其他用途。

操作步骤(仅供参考)：
1、(选做)制备样品：
①血浆、血清样品：取 0.02ml 待测血浆、血清样品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，
充分混匀，室温静置 10min，3000g 离心 10min，取上清，-20℃冻存，用于 Pi
的检测。

②尿液样品：取适量的待测尿液，用 50%的盐酸调 pH 至 6.0。用蒸馏水做 1:10-1:20
稀释。取 0.02ml 稀释后的尿液样品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混匀，室
温静置 10min 3000g 离心 10min，取上清， 20℃冻存，用于 Pi 的检测。
 
试剂名称：
试剂(A): 磷标准(1mg/ml) 1ml 4℃
试剂(B): 标准品稀释液 10ml 4℃ 避光
试剂(C): Pi Assay buffer 80ml 4℃ 避光
试剂(D): 硫酸亚铁钼蓝显色液 3ml 4℃ 避光
 

磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)产品简介

③细胞戒组织样品：取恰当细胞戒组织进行匀浆，低速离心取上清。取 0.02ml 匀浆
样品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置 10min，3000g 离心
10min，取上清，-20℃冻存，用于 Pi 的检测。

④高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Pi，可以使用去离子水稀释。

⑤(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续
计算单位蛋白重量组织戒细胞内的 Pi 含量。

2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准(1mg/ml)，按磷标准(1mg/ml)：标准品稀释液
=1:24 的比例稀释，即获得磷标准(1.292mmol/L)。取 0.02ml 磷标准(1.292mmol/L)，
加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置 10min，3000g 离心 10min，取
上清，即为磷酸标准工作液，-20℃冻存，用于 Pi 的检测。
3、Pi 检测：按下表操作。
4、混匀，室温静置 15min，酶标仪 640nm 处检测，以空白管调零，读取各管吸光度值。

注意事项：
1、 溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
2、 本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。

磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)产品简介