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产品分类技术文章/ Technical Articles
Dmem(A)细胞培养基(粉末型)成分序号化合物名称含量(mg/L)序号化合物名称含量(mg/L)1无水氯化钙.2H2O265.0018L-丝氨酸42.002硝酸铁.9H2O0.1019L-苏氨酸95.003氯化钾400.0020L-色氨酸16.004无水硫酸镁97.6721L-酪氨酸72.005氯化钠6400.0022L-缬氨酸94.006无水磷酸二氢钠109.0023D-泛酸钙4.007丁二酸75.0024酒石酸胆碱7.208丁二酸钠100.0025叶酸4.009L-盐酸...
Q:westernblot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。Q:请问封闭液和抗体稀释液用BSA和脱脂奶粉有什么区别呢?有人跟我说奶粉的封闭效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做elisa或者phagedisplay时候,蛋白铺板的话,不能使用脱脂奶粉。可是也有人说可以,请问是否有这个说法呢?A:所谓封闭是用以减少或消除载体上的非特异性结合蛋白的分...
考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。1.实验部分1.1仪器与试剂:LabtechUVPOWER紫外分光光度计;玻璃比色皿一套;考马斯亮蓝G250;牛血清蛋白;超纯水。1.2试液的制备:牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加...
(一)、仪器设备1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;2)水浴锅(二)、试剂1)pbs缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。3)0.5mol/LEDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10mmol/LNaOH调至pH...
三月二十日,来自中科院广州生物医药与健康研究院、武汉菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷泽大学的研究人员,在学术期刊《JournalofBioLogicalChemistry》发表学术论文,该研究检测了iPSC生成及随后基因校正过程中的基因组不稳定性,指出重编程和基因打靶可能会产生大量但却不同的基因组变化,因此,在iPSC诱导时及基因打靶之后,必须进行严格的基因组监控和选择。本文通讯作者是中科院生物医药与健康研究院研究员潘光锦博士,其2002年硕士毕业于...
关于293/293T细胞1、种属都为人,不是鼠。2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形态为上皮细胞,能致瘤。4、染色体核型:亚三倍体人细胞系。染色体众...
一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。*,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(*抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体...
实验原理:PCR扩增是模拟天然DNA复制过程,利用DNA聚合酶在体外(试管中)扩增一对引物之间特异性DNA片段的方法。其主要热循环过程可分为三个步骤:(1)高温变性(denature):提供DNA复制的有效模板。(2)低温退火(anneal):引物与模板DNA复性,提供游离3’-OH端供DNA复制起始;(3)中温延伸(extend):依赖Mg2+,DNA聚合酶催化合成与模板互补的新的DNA分子。以上变性、退火、延伸三个过程组成一个循环周期;常循环25~40周期,经过n轮循环后...
如今,几乎每位研究人员都或多或少地知道生成诱导多能干细胞(iPSC)的配方。拿出体细胞,加入四种转录因子,等待几个星期,搞定!不过,这其中到底发生了什么,却是一个谜,人们想了解却还未了解。显然,这涉及到表观遗传学:从成纤维细胞转变成iPSC,意味着那些过去关闭的基因必须再次启动。其他基因,比如细胞分化的标志,则必须调低。西奈山医院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的资深科学家AndrasNagy谈道:“每个细胞的基因组都几乎是相同的。表观基因组哪些基因表达,哪些蛋白...
G-protein-coupledreceptors(GPCRs)areactivatedbyawidevarietyofexternalstimuli.UponreceptoractivationtheG-proteinexchangesgdpforGTP,causingthedissociationoftheGTP-boundGalphaandtheGbetagammasubunits,triggeringdiversesignalingcascades.Receptor...