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检测低密度脂蛋白和高密度脂蛋白时候的样本处理资料
更新时间:2018-05-17   点击次数:887次

检测低密度脂蛋白和高密度脂蛋白时候的样本处理资料!

上海信帆生物代理销售低密度脂蛋白检测试剂盒和高密度脂蛋白检测试剂盒,产品现货供应,提供实验代测服务,欢迎大家!

 样本处理:

血清(浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。 ②、培养液样本:吸取培养液,1000 转/分,离心 10 分钟,取上清测定。

 [注]:一般建议细胞密度在 100万个/ml以上。 ③、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的匀浆介 质,冰水浴条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。

 [注]:1、如组织样本为非高脂样本,匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。

检测低密度脂蛋白和高密度脂蛋白时候的样本处理资料!

 2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。 

细胞样本: A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉 淀;用等渗缓冲液(推荐0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液)清洗1~2 次,同样1000 转/分,离心10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;

 B、细胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的匀浆介质(推荐 0.1mol/L、pH7~7.4磷酸盐缓冲液或生理 盐水)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率:300W,3~5 秒/次,间隔 30 秒,重复 3~5  次)或手动匀浆,制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40分钟),裂解好的液体不离心直接测定。 

[注]:一般建议细胞密度在 100万个/ml以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎* 


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