过氧化氢含量（H2O2）试剂盒现货供应，过氧化氢测试盒

过氧化氢（hydrogen peroxide），化学式H2O2。纯过氧化氢是淡蓝色的黏稠液体，可任意比例与水混溶，是一种强氧化剂，水溶液俗称双氧水，为无色透明液体。其水溶液适用于医用伤口消毒及环境消毒和食品消毒。在一般情况下会缓慢分解成水和氧气，但分解速度极其慢，加快其反应速度的办法是加入催化剂——二氧化锰等或用短波射线照射。

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过氧化氢含量（H2O2）试剂盒说明书

规格：100 管/96 样
试剂的组成和配制：
试剂一：丙酮 100mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 3mL 浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂 4℃保
存；(溶解时间较长，约 30min，务必提前准备)
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；

过氧化氢含量（H2O2）试剂盒现货供应，过氧化氢测试盒

产品说明：
H2O2 是生物体内zui常见的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生，由 CAT 和 POD
等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2 可以
直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老
和解体；另一方面 H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在 415nm 有特征吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、丙酮 100mL、
浓盐酸 5mL、研钵和冰。
操作步骤：
一、 H2O2 提取：
1. 细菌或细胞样品的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10
4
个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；用试
剂一定容至 1mL；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2. 组织样品的制备：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组
织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆；转移至 EP 管中，用试剂一定容至 1mL，8000g 4℃离
心 10min，取上清，置冰上待测。
3. 血清（浆）样品：直接检测。
二、 测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 415nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂二、三和四 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。
3、在 EP 管中按顺序加入下列试剂
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试剂名称（μL） 测定 对照
样本 250
试剂一 250
试剂二 25 25
试剂三 50 50
4000g，25℃离心 10min，弃上清，留沉淀
试剂四 250 250
加入试剂四溶解沉淀后，室温静置 5min，取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中测定
415nm 处吸光值 A。对照管只要做一次即可。计算 ΔA＝A 测定-A 对照。
注意事项：
1. 由于试剂一易挥发，试剂一必须先预冷再加，研磨时必须在冰上研磨。
2. 本试剂盒中试剂的挥发性较高，请带一次性手套和口罩。
三、 H2O2 含量计算：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.062x - 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。
2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算：
H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.062=16.13×(ΔA＋0.08)
3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算
（1）按照蛋白浓度计算
H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(V1×Cpr)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样本质量计算
H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(W ×V1÷V2)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷W
(3 ) 按照细菌或细胞密度计算：
H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(500×V1÷V2)=0.032×(ΔA＋0.08)
V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓
度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
b. 用 96 孔板测定 的计算公式如下
1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.031x - 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。
2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算：
H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.031=32.26×(ΔA＋0.08)
3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算
（1）按照蛋白浓度计算
H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(V1×Cpr)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样本质量计算
H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(W ×V1÷V2)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷W
(3 ) 按照细菌或细胞密度计算：
H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(500×V1÷V2)=0.064×(ΔA＋0.08)
V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓
度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
注意：zui低检测限为 1μmol/mL 或 1μmol/g 鲜重或 10nmol/mg prot

过氧化氢含量（H2O2）试剂盒现货供应，过氧化氢测试盒

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