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信帆生物提供腺病毒包装系统及病毒实验!
更新时间:2017-12-15   点击次数:1303次

信帆生物提供腺病毒包装系统及病毒实验!

腺病毒载体是以腺病毒为原型进行基因功能改造而成的无外壳的双链DNA病毒,由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,重组腺病毒已越来越广泛地被应用于基础研究和研究试验中,并成为世界上zui常用的基因治疗载体之一。

病毒包装系统及病毒实验的优点:

1、可感染的细胞种类多,宿主广泛;
2、感染效率高,特别适合质粒载体转染效率低的细胞,如原代细胞、神经细胞等,且目的蛋白表达水平高;
3、可包装大片段的外源基因,高达10kb;
4、不整合到细胞染色体中,生物安全性高。
腺病毒包装技术主要原理是将目的片段克隆到腺病毒表达载体上,表达载体和包装质粒通过重组导入腺病毒包装细胞进行包装,包装好的病毒进一步进行扩增和滴度测定。

信帆生物提供腺病毒包装系统及病毒实验!

AdMAX系统:
AdMax包装系统是通过Cre/loxP 获得重组病毒,这个过程发生在HEK293细胞中,从而避免在细菌中重组。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的包装质粒共转染HEK293细胞,利用Cre/loxP系统的作用实现重组,产生重组腺病毒。这个系统有多种优势,包括操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高、目的基因的表达水平高(因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍)等。
可根据不同的研究需求构建腺病毒穿梭载体,如用于RNAi的腺病毒载体、用于基因过表达的腺病毒载体、用于启动子活性研究的腺病毒载体等

技术流程:
1.获得目的基因序列;
2.构建病毒表达载体质粒;
3.表达载体质粒和包装质粒重组;
4.感染HEK293,包装出病毒;
5.病毒扩增、浓缩;
6.滴度测定。

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