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信帆生物为大家分享:免疫组化实验中消除非特异性背景着色
更新时间:2016-08-05   点击次数:1736次

信帆生物为大家分享:免疫组化实验中消除非特异性背景着色。上海信帆生物代做免疫组化实验,欢迎大家!

 消除非特异性背景着色

非特异性着色zui常见的情况是蛋白质(抗体)吸附到组织切片中高度荷电的胶原及结缔组织成分上,防止非特异性背景着色的方法之一是在滴加一抗前在标本上加一种无关的蛋白质溶液,封闭荷电点不给一抗留有吸附余地,以保证一抗不会吸附到胶原纤维及结缔组织成分上。zui常用的无关蛋白质溶液是所用二抗的同种动物非免疫血清。用产生二抗的同种动物血清,是为了避免二抗与预先加入的蛋白质结合引起假阳性染色。
用来阻断非特异性结合的血清不能有任何溶血现象。红细胞破裂会使其中的过氧化酶与底物作用,产生非抗原特异性的阳性着色。多克隆抗体因其成分复杂,更易造成背景染色。稀释液采用含 1%BAS pH7.4 的 PBS ,同时在洗液中加入 0.05%的吐温 20 ( Tween20 )有助于消除背景染色。

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