信帆生物：CCK8实验技术服务

信帆生物：CCK8实验技术服务

信帆生物主营产品: 质控样品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。

CCK8 是一种用于‌检测细胞增殖和细胞毒性‌的常用方法，核心原理是利用试剂中的 WST-8 成分，在活细胞脱氢酶作用下生成水溶性黄色甲臜，颜色深浅与活细胞数量成正比，通过酶标仪测定 450nm 波长的吸光度（OD 值）来反映细胞活性 。

实验步骤（仅供参考）‌‌‌

1、细胞消化计数，接种至 96 孔板，设置空白组、对照组、不同药物浓度组，每组设置复孔。

2、细胞培养至合适汇合度，加入梯度浓度药物，孵育指定时间。

3、每孔加入 CCK8 工作液，避光孵育 1~4 h。

4、酶标仪读取 450 nm OD 值。

5、计算细胞存活率，绘制浓度效应曲线。 

结果判读：

1、存活率＞80%：药物无明显细胞毒性，可用于后续功能实验

2、存活率≈50%：对应浓度为 IC50（半数抑制浓度）

3、存活率明显下降：药物存在细胞毒性 

注意事项：

1、CCK8 避光保存，加样避免产生气泡，气泡影响读数。

2、设置溶剂对照组，保证各组溶剂终浓度保持一致。

3、96 孔板边缘孔易液体蒸发，可用 PBS 填充边缘孔减少误差。

4、每组设置≥3 个复孔，实验独立重复至少 2 次。

4、仅能反映活细胞数量，无法区分增殖抑制与细胞凋亡。