粪便基因组DNA快速提取试剂盒这么使用更精确

上海信帆生物供应粪便基因组DNA快速提取试剂盒，产品质量稳定，现货供应！

储存条件：常温保存，保质期1 年。
产品内容：
产品内容DE281-50T
裂解液I 25 mL
纯化液II 25 mL
结合液III 40 mL
洗涤液50 mL
洗脱液（TE） 10 mL
硅胶膜DNA 吸附柱50 套
说明书1 份
产品介绍:
粪便基因组DNA 快速提取试剂盒适用于从各种动物粪便中快速提取基因组DNA。
提取的DNA OD260/280 一般在1.8 以上，纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接或者稀释后用作PCR
扩增的模板。
可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
注意事项：
1. 裂解液I 容易产生沉淀，，用前需要放置在65℃预热使沉淀溶解，用前充分摇匀。
2. 自备试剂：氯仿。
（一）样品裂解：
1. . 称取0.1-0.3 g 的粪便，加入到含0.5mL 预热裂解液I 的1.5mL 的离心管中，震荡器上剧烈震荡5-10
分钟。如果是扩量操作，可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处
理，然后再分到1.5 mL 离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的粪便震荡起来。
2. 将离心管置于65℃水浴中保温至少10 分钟。
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3. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际
颜色随样品而异，上清液的体积一般为300-400 μL)。
（二）样品纯化：
1. 在上清液中加入等体积的裂解液II，上下颠倒30 秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
2. 将离心管冰浴至少5 分钟。
3. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，转移上清到新的1.5 mL 离心管中，体积在0.7 mL 左右。
4. 加入0.2 mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡30 秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
5. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，小心转移上清到新离心管中。
说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。将0.5 mL 上清转
移到新的1.5 mL 离心管中。如果有多余的可以弃之不用。
（三）基因组DNA 收集：
1. 在步骤（二）所得的上清中加入0.8mL 的结合液III，颠倒数次混匀后，分多次上同一DNA 吸附柱，每
次上柱后均先室温放置2 min，然后12,000 rpm 离心1 min，倒掉穿透液。
2. 在吸附柱中加入500 μL 洗涤液，12,000 rpm 离心1 min，弃穿透液。
3. 再将吸附柱12,000 rpm 离心30 s 以甩干乙醇。
4. 将吸附柱放入一个干净的1.5 mL 离心管中。在吸附柱中央加入50 μL 洗脱液（65-70℃预热），室温
静置5 min。12,000 rpm 离心2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm 离心1 min 以洗脱更多
基因组DNA。
5. 检测DNA 质量。将所得的基因组DNA 保存于-20ºC 冰箱。

粪便基因组DNA快速提取试剂盒这么使用更精确