信帆生物销售淀粉分支酶，欢迎抢购

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测定意义

SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。

测定原理

淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×2支，4℃保存；临用前每支加入1mL双蒸水，充分溶解后备用；

试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存；

试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存；

粗酶液提取

称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。15000g ，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。

测定步骤

混匀，37℃准确保温20 min，置沸水浴中1 min终止反应（盖紧防止水分散失），冷却

混匀，室温静置10min，用蒸馏水调零，660nm处读取各管吸光值。

注意：

1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行1min沸水浴处理。

2、试剂一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。

SBE活力单位的计算

方法（一）按照蛋白浓度计算

单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在反应体系中每降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。

1. 活性（U/mg prot）=（A对照管-A测定管）/A对照管÷蛋白浓度(mg/mL) ×100

方法（二）按照样本鲜重计算

单位的定义：以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每g组织在反应体系中每降低1％碘蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性（U/g 鲜重）=（A对照管-A测定管）/A对照管÷样本鲜重(g/mL) ×100

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