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植物可溶性糖含量检测试剂盒说明书
更新时间:2019-07-04   点击次数:1681次

植物可溶性糖含量检测试剂盒说明书

上海信帆生物供应植物可溶性糖含量检测试剂盒,产品备有大量现货库存,欢迎咨询!

可见分光光度法

规格:50T/48S

产品内容: 试剂一:粉剂×2 瓶,4℃避光保存;

试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

标准品:粉剂×1 支,4℃保存,含 10mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),

临用前加入 1mL 蒸馏 水溶解,配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液备用,4℃可保存 1 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存 更长时间。

标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL。

产品说明: 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖是指 样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的 淀粉。

检测原理为蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高﹑简便快 捷﹑适用于微量样品的测定等优点。

试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、浓硫酸、研钵和蒸馏水。

操作步骤: 一、样品中可溶性糖的提取: 称取约 0.1~0.2g 样本,加入 1mL 蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,沸水浴 10 min(盖 紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,常温离心 10min,取上清液于 10mL 试管中,用蒸馏水定 容至 10mL,摇匀备用。

二、测定操作表:

1. 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。

2. 调节水浴锅至 95℃。

3. 工作液的配制:在试剂一中加入 5 mL 试剂二,充分溶解后使用,如较难溶解,可加热搅拌。

4. 加样表(在 EP 管中反应): 试剂(µL) 空白管 测定管 标准管 样本 200 标准液 200 蒸馏水 

混匀,置 95℃水浴中 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,于 620nm 处,分别读 取空白管和测定管吸光值,∆A=A 测定管-A 空白管。 标准曲线的建立:620nm 处蒸馏水调零,读标准管吸光值,A=A 标准管-A 空白管。以浓度(y)为 纵坐标,吸光度 A(x)为横坐标建立标准曲线。

注意: 1. 空白管只要做一管。 2. 如果∆A 大于 1,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。 3. 由于浓硫酸具有强腐蚀性,请谨慎操作。

三、可溶性糖含量计算: 1、根据标准曲线,将∆A 带入公式中(x)计算样品浓度 y(mg/mL)。 2、按样本鲜重计算: 可溶性糖(mg /g 鲜重)= (y×V1)÷(W×V1÷V2)=10×y÷W 3、按样本蛋白浓度计算: 可溶性糖(mg / mg prot)= (y×V1)÷(V1×Cpr)=y÷Cpr V1:加入样本体积,0.2mL;V2:提取液体积,10mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W: 样本鲜重,g。

植物可溶性糖含量检测试剂盒说明书