Western blot细胞样本的处理小贴士

Western blot细胞样本的处理小贴士

上海信帆生物代做Western blot实验，下面我们给大家分享一下细胞样本中关于悬浮细胞和贴壁细胞样本的处理方法，希望对大家有所帮助，如果还有不清楚的地方，上海信帆生物科技有限公司，您身边的科研专家！

细胞样本做WB检测
1、悬浮细胞样品：把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。

2、贴壁细胞样品：
2.1 胰酶消化：用胰酶将细胞消化后，收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。

2.2 细胞刮子收集细胞：对于某些蛋白（即对胰酶比较敏感或者实验特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化后进行WB检测），直接用细胞刮子刮下细胞，收集到EP、15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。

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