信帆生物告诉您：葡聚糖凝胶填料的使用方法

使用方法

1.凝胶预溶胀

在凝胶使用前，首先将其溶胀，具体方法：室温下，将干粉浸泡在超纯水中充分溶胀24小时，并不断搅拌保证凝胶 充分溶胀；或者在室温下，将干粉浸泡在50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶*溶胀，用超纯水洗去乙醇；

2.装柱

将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性注入柱内，注意要避免柱内产生气泡或者断层，保持湿态装柱，可在凝胶可承受的操作压下装柱，保证装柱均匀，装完柱可以检测柱效，检查凝胶装填是否合格。

3.平衡

上样前用平衡液平衡层析柱至少3-5个柱体积直到基线平稳；

4.上样

凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，初次上样建议控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可

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5.洗脱方法

可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化；

6.在位清洗（CIP）

凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

7.保存

凝胶使用完后，可将其回收，可将凝胶用超纯水冲洗干净并滤干，加入0.02%的叠氮钠做为防腐剂，或者浸泡在20%的乙醇中，防止长菌。

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