白介素10（IL-10)ELISA试剂盒检测前准备工作
白介素10（IL-10)ELISA试剂盒检测之前需要做哪些准备工作？下面就让小编带您做个简单的了解。
1.试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡20分钟；每次检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。
2.将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。
3.标准品:加入标准品稀释液0.25ml至冻干标准品瓶中使IL-1β终浓度达到250pg/ml，静置15分钟后轻轻混悬待*溶解，用标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。（标准曲线取七个点，zui高浓度为250pg/ml,标准品稀释液直接加入作为0浓度.）
白介素10（IL-10)ELISA试剂盒洗涤方法:
自动洗板机或人工洗板：每孔洗涤液为300ul，注入与吸出间隔15-30秒。洗板5次。zui后一次洗板完成后将板倒扣着在厚吸水纸上用力拍干。
实验过程需自备的材料：
1.不同规格的加样枪及相应的枪头；2.酶标仪；3．自动洗板机；4．去离子水或双蒸水；
白介素10（IL-10)ELISA试剂盒操作步骤:
1.通过计算并确定一次性实验所需的板条数，取出所需板条放置在框架内，暂时用不到板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃。
2.建议设置本底较正孔，即空白孔,设置方法为该孔只加TMB显色液和中止液。每次实验均需做标准品对照并画出标准曲线。
3.分别将标本或不同浓度标准品(100ul/孔)加入相应孔中，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120分钟。对于血清或血浆标本，请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本，如稀释量大，请将样本与样本分析缓冲液等量加入，不足部分用标准品稀释液补充至100ul。
4.洗板5次，且zui后一次置厚吸水纸上拍干。
5.加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，室温孵育60分钟。
6.洗板5次，且zui后一次置厚吸水纸上拍干。
7.加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温孵育20分钟。
8.洗板5次，且zui后一次置厚吸水纸上拍干。
9.加入显色剂TMB100ul/孔，避光室温孵育20分钟。
10.加入终止液50ul/孔,混匀后即刻测量OD450值。
更新时间：2017-09-19 
浏览次数：1004
您的位置：
