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生化样本准备方法及要求

更新时间:2024-05-07      浏览次数:71

生化样本准备方法及要求:

以下所有样本必须尽量新鲜!

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(μL=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,研磨仪匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000rpm/min,离心10min,取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2h内或4℃过夜后于4 3000rpm/min离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

1.生化、ELISA:可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于4℃ 3000rpm/min离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

2.凝血四项:抽取静脉血,按照9份静脉血、1份抗凝剂的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸橼酸钠抗凝管中,轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块,不得形成泡沫。

3.采样后应尽快分离血浆(60分钟内进行),将标本以3000rpm/min离心10-15min,使血浆分层,取上层血浆。

4.分离后的血浆-20℃以下密封可保存2周。干冰运输。

4、细胞样本

贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000rpm/min,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

悬浮细胞:将培养液3000rpm/min,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

细胞上清:标本于4℃,3000rpm/min离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。


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