实惠又好用的金担子素A现货

实惠又好用的金担子素A现货

上海信帆生物供应金担子素A，产品质量稳定，现货供应！

金担子素A（Aureobasidin A，AbA）是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素，具有很强的抗真菌能力。AbA作用机制是抑制酵母中AUR1基因（1，2）编码的肌醇磷酰胺（inositolphosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而杀死菌株。AbA在较低的浓度下（0.1-0.5 μg/mL）即可对酵母产生毒性。编码IPC合成酶的基因研究较多的来自酿酒酵母菌的AUR1基因，以及构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性。通过对编码AUR1-C基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性，作为蛋白质互作研究的报告基因。

因为AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株，而不是延迟菌株生长，所以AbA筛选有利于阳性克隆的生长和识别。与营养报告基因（如HIS3）进行的低严紧度初筛相比，AbA筛选大大消除了背景克隆。实际操作中，用AbA进行初筛时会获得更多克隆，之后再用4个报告子(AUR1-C，HIS3，ADE2和MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记；也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子，可以简化酵母双杂交文库筛选。

二、使用方法：

  1、本品为AbA的甲醇溶液，浓度为1 mg/mL，直接用作储存液。

  2、灭菌后YPD Agar培养基（PM2020）冷却至50-55 ℃，加入适量的AbA储液，倒板备用。

  （AbA工作浓度取决于宿主细胞的敏感度，见下表） 

  3、制备酵母感受态细胞并完成转化，参考SK2400，SK2401。

  4、把100 μl完成转化酵母细胞悬液涂到含有适量AbA的YPD Agar培养基平板上，30℃培养2-4天。

  5、挑取克隆鉴定，或统计转化效率。

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