基质金属蛋白酶MMP2/9明胶酶谱法试剂盒操作原理

   基质金属蛋白酶MMP2/9明胶酶谱法试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1 nM，高于ELISA。

    其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE 凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电
泳， 电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer 孵育，凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深
染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色
而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶谱)及活性。

    本试剂盒提供MMP-2、MMP-9 特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶谱及活性，检测灵敏度~1 nM。试剂盒可进行50 次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750 个样品。