ELISA 样本处理的注意事项

每个标本量收集体积＝ 50ul × 检测种类，如要做复孔，标本量收集体积＝ 50ul × 检测 种类×2 。

 对于作某一个具体指标来说，先用一系列稀释度作一批标本测定，得出对实验有意义 的一个稀释度（即测定剂量反应曲线），然后用一个zui适稀释度测定即可。

         收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在

4 ℃ 备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条

件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时， -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度

可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

血清标本采集时，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质， 以 HRP 为标记的 ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。

      为了尿液检测结果的准确性，必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。

使用一次性的容器（如塑料尿杯），避免因用药并清洗不干净而造成的污染，影响检 测结果。尿液标本必须新鲜，留取后，应及时检测或保存，以免细菌繁殖。因在室温中久 置后（尤其是夏季）尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。

标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。 保存过久可发生聚合在 ELISA 中可使本底加深。

冻结标本融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠 倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。

     混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。

反复冻融会使蛋白效价降低，所以待测标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。也可 加入适当防腐剂。