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关于做免疫组化和WB检测时候抗体的相关问题答疑

更新时间:2014-04-22      浏览次数:3192

1、免疫组化和Western Blot可以用同一种抗体吗?
答:免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都含有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。
2Western Blot 中抗体的可以重复应用吗?
答:抗体工作溶液一般不主张储存反复使用,但是如抗体比较珍贵,可反复使用23次。稀释后应在23天内使用,4度保存,避免反复冻融。

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