如何用ELISA试剂盒检测硫磷残留

通过制备对硫磷的特异性抗体，建立了蔬菜中对硫磷残留的酶联免疫吸附分析法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。先将对硫磷苯环上的硝基还原为氨基，然后采用重氮化法将氨基-对硫磷与牛血清白蛋白（BSA）或卵清白蛋白（OVA）相偶联，分别合成了免疫原和包被抗原：氨基对硫磷-BSA、氨基对硫磷-OVA。对合成的抗原进行紫外可见扫描，确证偶联成功。用免疫原免疫新西兰大耳白兔，制得对硫磷抗血清，测得其效价为1：2000，用饱和硫酸铵沉淀法得到纯化抗体，与其它类似物的交叉反应为甲基对硫磷：1.22％，毒死蜱：0.09％，杀螟松：0.06％，标准曲线的线性范围为5-1000ng／mL。用此血清建立的ELISA方法检测蔬菜样品（小白菜、豆角、辣椒）中添加的对硫磷标准样品，平均回收率为96.52％，与GC方法的相关性很高，准确性大大高于酶抑制法，整个测定大约在（不包括包被时间）1.5h内完成。