信帆生物：液体样本铁离子含量测试剂盒原理介绍

信帆生物：液体样本铁离子含量测试剂盒原理介绍

信帆生物专业研发并销售各类科研生化试剂盒，深耕生物化学检测与生命科学研究领域，长期服务全国高校、科研院所及生物医药研发单位。公司生化试剂盒品类-齐全，广泛覆盖氧化应激、能量代谢、肝功能、肾功能、糖脂代谢、抗氧化指标等主流科研检测项目，适配多物种样本检测需求，现货储备充足。所有产品均经过严格的精度、重复性与稳定性质控，操作简便、检测结果可靠、批间误差小，可满足样本批量检测、机制研究、药物评价、模型验证等科研场景。公司配备专业技术团队，提供产品选型、实验指导、技术答疑等一站式配套服务，为各类生化科研实验提供稳定优质的产品支撑。

产品名称：液体样本铁离子含量测试剂盒（比色法）

产品货号：XFH3001

规格：100T

储存条件：4℃

有效期：6个月  

描述：铁是人体必需的元素之一，对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用，血液中铁的含量不足，就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内，各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁3～5克，大部分都以蛋白质复合物形式存在，极少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量液体铁离子含量，线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照，本试剂盒可进行100个样品的检测。

原理：

铁被还原剂还原成二价铁，并与亚铁嗪生成紫红色化合物，在540-580nm处可比色测定。 其反应如下图所示：

组成：

1. 缓冲液：        5ml

2. 检测剂：        3ml

3. 标准品：        1ml

4. 稀释用液：      20ml

适用范围：该试剂盒可用于血清，培养基中铁离子定量检测。

用户自备：4.5%高锰酸钾溶液5ml。

操作步骤： 

1. 标准品的稀释：用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的标准品母液稀释为：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。

2. 将缓冲液与4.5%高锰酸钾溶液按1:1混匀，称为混液A。

3. 参考下表使用1.5ml离心管，设置空白对照管、标准品管和样品管。如果样品中的铁元素含量过高，用裂解液适当稀释后再进行测定。  

4. 混匀，60℃ 孵育1h。

5. 冷却至室温，将管盖与管壁上的液滴离心入管底。

6. 加入30ul 铁离子检测剂，混匀，室温孵育，30min。

7. 取200ul 于96孔板，在550nm测定吸光度。如果不能测定550nm，也可以在540nm~580nm范围内检测。

8. 绘制标准曲线并计算铁离子浓度。

说明：

1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的干扰。
2. 操作过程中，样品与试剂等避免与铁器接触，以防污染。

3. 所测样本的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服、防护面罩并戴一次性实验手套操作，检测试剂有腐蚀性，请小心操作，若不慎沾到皮肤上请马上用清水冲洗干净。

5. 该试剂盒仅供科学研究使用。

仅供科研实验用，不做其他用途！