基质金属蛋白酶(mmp2/9)试剂盒的操作注意事项是什么？
更新时间：2021-12-26 点击次数：472次
基质金属蛋白酶(MMPs)是锌钙依赖性蛋白水解酶家族成员,可分解细胞外基质(ECM),在不同的亚细胞环境中,参与多种分子的加工过程。MMPs在众多生理学进程中发挥重要功能,例如胚胎发育、形态发生、繁殖以及组织重构。也参与以及自身免疫疾病,例如、和。新合成的MMPs的量主要在转录水平被调节,已经存在的MMPs的蛋白水解活性,不仅受控于酶原的活性,也受控于内源性抑制剂对酶活性的抑制,例如α2-巨球蛋白,以及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)。
基质金属蛋白酶(mmp2/9)试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)为基础,可用于检测细胞、组织内的特异性抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的一抗与相应靶抗原结合后,用生物化二抗与一抗特异性结合,加入HRP-SA,形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA复合物,显微镜下观察成像。
基质金属蛋白酶(mmp2/9)试剂盒的操作注意事项：
1.试剂盒的操作方法同WB是一样的
2.试剂盒的阳性对照，是选用全血做对照，具体如下操作如下：
阳性对照（可选步骤）：可取人、小鼠、大鼠或兔100μl全血与100μl2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer等体积混合，取5-15μl上样。
3.在操作孵育的时候，建议孵育5小时
4.本试剂盒可以检测MMP2/9活性，同时可以测定PROMMP2/9，可根据实验需要，选取观察。
5.本试剂盒上样蛋白建议20ug。
