ELISA检测试剂盒原理我知道的全在这了
更新时间：2020-07-09 点击次数：1672次
1、抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并坚持其免疫学活性；
2、抗原或抗体可通过共价键与酶衔接构成酶结合物，而此种酶结合物仍能坚持其免疫学和酶学活性；
3、酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可依据参加底物的色彩反响来断定是否有免疫反响的存在，并且色彩反响的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，ELISA检测试剂盒可依据已知浓度的抗原或抗体的色彩反响的深浅制作规范曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。
4、试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠丙氨酸氨基转移酶（ALT）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。
5、用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠丙氨酸氨基转移酶（ALT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
二：ELISA检测试剂盒的注意事项：
1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6、在储存和温育时避免强光直接照射。
7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
小编总结：检测试剂盒有必要恪守以下中心原理，看完本文您就应该有了基本的认识和了解相信大家都明白了吧！总的来说，希望对大家有所帮助。
