明胶酶谱分析试剂盒操作要领！

上海信帆生物供应明胶酶谱分析试剂盒，操作简单方便，可以同时检测MMP2和MMP9的活性，操作方法和免疫印迹相类似。

操作要领：

1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。

2.明胶酶谱的活性受钙离子，锌离子，和PH值等因素的影响，因此缓冲液配制应严格准确，尽量用超纯水，孵育温度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6，复性的TRITON时间长了会有絮状物，所以实验时尽量使用新鲜配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培养箱中，因为会改变孵育液的PH值，在普通孵箱即可。

6.明胶要4度保存，配好后1周内使用。

7.样本活性低可以延长孵育时间到48小时

MMP检测注意事项：细胞培养基要用无血清培养基；样本裂解时不含EDTA,明胶酶谱的活性受钙离子，锌离子，和PH值等因素的影响，因此缓冲液 配制应严格准确，尽量用超纯水，孵育温度也掌握好。因为检测蛋白活性,所以应尽量避免蛋白变性,一般都要求冰上操作,电泳也放在冰水里进行的。

附上一张明胶酶谱试剂盒的条带图

明胶酶谱分析试剂盒操作要领