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elisa检测服务对标本的要求
更新时间:2018-09-27   点击次数:1076次
   elisa检测服务对标本的要求
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2.不能检测含nan3的样品,因nan3抑制辣根过氧化物酶的(hrp)活性。
  人蓖麻毒素(ricin)elisa检测试剂盒操作步骤
  1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
  2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
  7.温育:操作同3。
  8.洗涤:操作同5。
  9.显色:每孔先加入显色剂a50µl,再加入显色剂b50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。