走近大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒试验原理

        E2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知E2浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将E2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中E2的浓度呈比例关系。

走近大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒内容及其配制

试剂盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶标板

1块板（96T）

半块板（48T）

塑料膜板盖

1块

半块

标准品：500pg/ml

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

空白对照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

标准品稀释缓冲液

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

生物素标记的抗E2抗体

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

亲和链酶素-HRP

1瓶（12ml）

1瓶（5ml）

洗涤缓冲液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

终止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml

自备材料：

1.  蒸馏水。

2.  加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.  振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处理及保存方法：

 血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、  血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、  细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、  组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

 5、  保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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