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促黄体生成激素放免试剂盒怎么操作
更新时间:2017-04-22   点击次数:1543次

促黄体生成激素放免试剂盒基本信息简介

中文名 促黄体生成激素;外文名  luteinizing hormone;属于促性腺激素的一种 简    称 LH 亦称促间质细胞激素。促黄体生成激素是由脑垂体前叶嗜碱性细胞分泌的,它作用于成熟的卵胞,能引起排卵并生成黄体。还可促进黄体、内荚膜和间质细胞分泌动情素。在雄性动物,它作用于睾丸的间质细胞促进其分泌雄性激素。由于雄性激素的作用,在第二性征发育过程中,精子完成发育。LH促进类固醇激素合成作用,据认为是以生成作为第二信息的cAMP为媒介的。LH为糖蛋白,分子量约3万。在酸性溶液中,可解离成分子量约为15000的互不相同的两个单基物(亚单位)。

羊的LH的两条多肽链(单基物)的氨基酸排列已经确定。其单基物之一与促卵泡激素(FSH)和促甲状腺激素(TSH)的单基物之一方有着共同或相似的结构。脑垂体分泌的LH,是受丘脑下部生成的黄体生成素释放因子所促进的。

促黄体生成激素放免试剂盒操作方法简介

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

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