生物通报道：在使用杀伤性武器的时候，不伤及无辜很重要，对于RNA干涉（RNAi）来说也是如此。RNAi是一种常用的基因失活工具，它的主要缺陷在于会引起序列特异性的脱靶效应。这样的脱靶效应很难预测，因为siRNA能够影响与它部分互补的序列，像miRNA那样抑制基因的表达。要减少脱靶效应，可以将针对同一mRNA的不同siRNA混合起来使用。这些siRNA作用于同一个目标，每种siRNA的浓度得以降低，稀释了各自的脱靶效应。然而，这一策略在实际操作中面临着两个问题。其一，目前“Sm...

环状RNA（CircularRNA,CircRNA），是一种广泛存在于生物体内的特殊RNA分子，与线性RNA相比，稳定性高，现已证实CircRNA广泛存在于生物体内，与线性RNA相比，稳定性高，对microRNA具有重要调控作用。CircRNA于2012年被科学家发现，2013年Nature杂志报道两篇关于CircRNA的研究成果，由此关于CircRNA的研究开始引起科学家的重视。利用高通量测序技术可鉴定CircRNA在生物样本中的种类、表达丰度及结构，对CircRNA的研究...

在基因组测序中，PCR扩增似乎是绕不过去的一步。然而，PCR也带来一些问题，包括不均匀扩增，导致某些序列的比例过高。对目前的新一代测序（NGS）平台而言，测序某些碱基组成上存在严重偏向的基因组区域仍是一大挑战。在GEN杂志上，PatriciaFitzpatrickDimond博士介绍了PCR-Free的基因组测序。文库制备的变革2009年，Sanger研究院的IwankaKozarewa博士及其同事介绍了一种无需扩增的Illumina文库制备方法（NatureMethods2...

一个由德国、瑞典和美国组成的研究组在室温条件下，利用LCLSX射线激光器，成功解码一种重要G蛋白偶联受体(GPCR)的3D结构。同时验证了LCLSX射线激光器的可行性。相关文章发表于2013年12月20日的《science》杂志上。Science：利用新技术在天然条件下成功获得g蛋白偶联受体3D结构GPCR功能GPCR是一个蛋白大家族，对人类健康有关键性作用，约40%的现代药物都靶标这类蛋白。与GPCR有关的疾病包括，高血压、哮喘、精神分裂症和帕金森症。由于这类蛋白的重要性，...

溶血空斑形成试验是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法，故又称体外抗体形成细胞(PlaqueFormingCell,PFC)测定技术。此项技术不仅可以作为免疫基本理论研究的有力工具，广泛地用于检测产生IgM类型(包括其它各类免疫球蛋白及其亚类)的抗体形成细胞，它还可作为研究筛选抗肿瘤新药以及研究中药对抗体免疫功能影响的免疫学指标。一、原理：溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合，在补体参与下，使抗体形成细胞周围那些受到抗体分...

案例一：DAB染色后切片着色一片黄/背景深背景：奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验，许多从北京购买的试剂买不到，对我们的许多实验产生了很大的影响。我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒，效果不错，在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验，*批组化实验结果很好，抗体浓度感觉比较合适(SantaCruz公司1：200)，等做第二批时发现封闭血清不够了，为了保证实验顺利进行，我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒，同时抗体稀释液也不够了，我又重新从博士德公司买了一...

实验原理：细胞中的DNA受1NHC1，60℃水解作用以后，核酸中的嘌呤碱很快*被除掉，使脱氧核糖中潜在的醛基获得自由状态。水解后，组织要经水洗再移至希夫（Schiff）试剂中，希夫试剂即同露出来的醛基发生反应，呈现紫红色。这个反应是Feulgen在1942年提出来的，是DNA的一个特异性检查法。水解的时间很重要，因为核酸的水解有两个过程，*，漂呤碱很快被除掉，脱氧核糖中潜在的醛基显露出来，第二，组蛋白和核酸愈来愈多地被除掉。在短时间的水解作用以后，*个过程占优势，这时候用希夫...

本文讨论的范围包括RNA酶保护分析，northernblot，原位杂交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不谈具体protocol，是因为各种书籍和kit说明书上都有，主要说一些原则，而且大部分是失败和成功的经验，还有小组讨论结果以及各种书里七零八落看的内容，希望对大家有用。基因表达的定义：说到基因表达，是指RNA，还是蛋白？是指mRNA还是包括风头正旺的非编码RNA？mRNA还有不翻译的RNA呢。应该说转录水平指的是RNA水平，而蛋白应该叫翻译水平？我们这里就特指编...

中文名：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名称：Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途：异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用*的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。IPTG常用于需要诱导β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与X-Gal或Bluo-Gal结合使用，用于重组细菌菌落的蓝白筛选，这些菌落可以诱导lac操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG与lacI阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用，防止β-半乳糖苷...

一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶联吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA中，抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，称为酶标植物激素，也可标记于第二抗体（识别抗激素抗体Fc片段的抗体或金黄色葡萄球菌A蛋白），称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相抗体型和固相抗原型ELISA。A.固相抗体型ELISA：将抗激素的单克...