关于293/293T细胞1、种属都为人，不是鼠。2、来源：293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形态为上皮细胞，能致瘤。4、染色体核型：亚三倍体人细胞系。染色体众...

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。*，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体(*抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合，将抗原放大，由于抗体...

实验原理：PCR扩增是模拟天然DNA复制过程，利用DNA聚合酶在体外（试管中）扩增一对引物之间特异性DNA片段的方法。其主要热循环过程可分为三个步骤：（1）高温变性（denature）：提供DNA复制的有效模板。（2）低温退火（anneal）：引物与模板DNA复性，提供游离3’-OH端供DNA复制起始；（3）中温延伸（extend）：依赖Mg2+，DNA聚合酶催化合成与模板互补的新的DNA分子。以上变性、退火、延伸三个过程组成一个循环周期；常循环25～40周期，经过n轮循环后...

如今，几乎每位研究人员都或多或少地知道生成诱导多能干细胞（iPSC）的配方。拿出体细胞，加入四种转录因子，等待几个星期，搞定！不过，这其中到底发生了什么，却是一个谜，人们想了解却还未了解。显然，这涉及到表观遗传学：从成纤维细胞转变成iPSC，意味着那些过去关闭的基因必须再次启动。其他基因，比如细胞分化的标志，则必须调低。西奈山医院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的资深科学家AndrasNagy谈道：“每个细胞的基因组都几乎是相同的。表观基因组哪些基因表达，哪些蛋白...

G-protein-coupledreceptors(GPCRs)areactivatedbyawidevarietyofexternalstimuli.UponreceptoractivationtheG-proteinexchangesgdpforGTP,causingthedissociationoftheGTP-boundGalphaａndtheGbetagammasubunits,triggeringdiversesignalingcascades.Receptor...

双PAG免疫金银染色原理(一)染色流程：(1)石蜡切片常规脱蜡至水，0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修复20min(98℃)，自然冷却至室温。(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH...

抗体药物作为生物技术产业的关键驱动力，能安全有效地对癌症、自身免疫病和感染性疾病等进行靶向治疗，该药物在2012年创下645.7亿美元的销售额，占生物制药51.8%的份额。目前抗体药物的市场需求量仍在攀升，预计到2015年，抗体药物销售额有望达980亿美元左右。业内人士认为，随着疾病谱变化，抗体药物的黄金时代已经来到。单抗药物的作用靶点很重要的一部分是行使细胞功能*的跨膜蛋白，包括多通道膜蛋白MMP(如g蛋白偶联受体)和离子通道，这些蛋白也是诊断检测的重要分析靶点。目前跨膜蛋...

一、目的通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。二、原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。层析溶剂由有机溶剂和水组成。物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值(比移)来表示的：R=原点到层析点中心的距离原点到溶剂前沿的距离在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。三、器材1、层析缸①2、毛细管3、喷雾器4、培养皿5、层析滤纸(新华一号)四、试剂1、扩...

T细胞受体(Tcellreceptor，TCR)是T细胞表面特异性识别抗原和介导免疫应答的分子，是人类基因组中多态性zui高的区域之一，决定着人的免疫系统如何适应环境的变化。T细胞受体库的多样性(包括基因重组以及选择性表达)直接反映了机体免疫应答的状态。TCR可分为TCRα/β和TCRγ/δ两种类型,外周血T细胞主要为TCRα/β的T细胞,是介导机体特异性细胞免疫反应的主要细胞。如图1所示：TCRβ基因由可变区(V)、多变区(D)、结合区(J)和恒定区(C)四部分基因片段组成...

实验室离心机离心管种类有多种。1、按材质可分：塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。2、按速度可分：低速离心管和高速离心管。3、按容量可分：微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。4、按离心管口部形状可分：缩口离心管和直口离心管。5、按离心管底部形状可分：圆底离心管、尖底离心管和平底离心管。6、按离心管与盖接合形式可分：摁盖离心管和螺口离心管。7、按用途可分：制备型离心管和分析型离心管。elisa试剂盒,进口elisa试剂盒,国产e...