本文讨论的范围包括RNA酶保护分析，northernblot，原位杂交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不谈具体protocol，是因为各种书籍和kit说明书上都有，主要说一些原则，而且大部分是失败和成功的经验，还有小组讨论结果以及各种书里七零八落看的内容，希望对大家有用。基因表达的定义：说到基因表达，是指RNA，还是蛋白？是指mRNA还是包括风头正旺的非编码RNA？mRNA还有不翻译的RNA呢。应该说转录水平指的是RNA水平，而蛋白应该叫翻译水平？我们这里就特指编...

中文名：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名称：Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途：异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用*的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。IPTG常用于需要诱导β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与X-Gal或Bluo-Gal结合使用，用于重组细菌菌落的蓝白筛选，这些菌落可以诱导lac操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG与lacI阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用，防止β-半乳糖苷...

一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶联吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA中，抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，称为酶标植物激素，也可标记于第二抗体（识别抗激素抗体Fc片段的抗体或金黄色葡萄球菌A蛋白），称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相抗体型和固相抗原型ELISA。A.固相抗体型ELISA：将抗激素的单克...

在细胞中，蛋白质并不是孤单的个体。大多数蛋白通过与分子伴侣或其他蛋白形成复合物而发挥其功能。因此，在了解细胞的生物学特性时，蛋白质相互作用（PPI）研究就成了重要一环。在药物开发的过程中，这一信息也至关重要，有助于确认药物靶点。一提起蛋白质相互作用研究，你的脑海中可能马上浮现出：酵母双杂交、免疫共沉淀等技术。的确，这些都是经典方法，可有效检测体内体外蛋白质相互作用。然而，它们不能提供动态的蛋白相互作用信息，似乎还缺乏一些说服力。基于此，共振能量转移这种方法受到人们的青睐。这种...

痛风发作会在人体关节部位引发炎症和剧烈疼痛，但过了一段时间后，炎症通常会自动减弱，疼痛感也逐渐消失。这为何会发生?德国研究人员发现，原因在于一种人体免疫细胞的“自杀式攻击”。痛风的病因是体内嘌呤物质新陈代谢紊乱，导致尿酸合成增加、排出减少，造成高尿酸血症。血液中尿酸浓度过高时，尿酸会以微小的钠盐结晶(俗称痛风石)形式析出，积累在关节、软骨和肾脏中，引发炎症。德国埃尔朗根大学近日发表研究公报称，其研究人员发现，人体免疫系统的嗜中性粒细胞在抗击痛风引发的炎症中发挥了关键作用。实验...

Dmem(A)细胞培养基（粉末型）成分序号化合物名称含量(mg/L)序号化合物名称含量(mg/L)1无水氯化钙.2H2O265.0018L-丝氨酸42.002硝酸铁.9H2O0.1019L-苏氨酸95.003氯化钾400.0020L-色氨酸16.004无水硫酸镁97.6721L-酪氨酸72.005氯化钠6400.0022L-缬氨酸94.006无水磷酸二氢钠109.0023D-泛酸钙4.007丁二酸75.0024酒石酸胆碱7.208丁二酸钠100.0025叶酸4.009L-盐酸...

Q：westernblot中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?A：脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封闭膜，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。Q：请问封闭液和抗体稀释液用BSA和脱脂奶粉有什么区别呢?有人跟我说奶粉的封闭效果更好些，但是通常只能用于WesterBlot，如果要做elisa或者phagedisplay时候，蛋白铺板的话，不能使用脱脂奶粉。可是也有人说可以，请问是否有这个说法呢?A：所谓封闭是用以减少或消除载体上的非特异性结合蛋白的分...

考马斯亮兰G250与蛋白质结合，在0－1000ug/ml范围内，于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速，结合产物在室温下10分钟内较为稳定，是一种较好的蛋白质定量测定方法。1.实验部分1.1仪器与试剂：LabtechUVPOWER紫外分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250；牛血清蛋白；超纯水。1.2试液的制备：牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加...

（一）、仪器设备1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉；2）水浴锅（二）、试剂1）pbs缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl137mmol/L，KCl2.7mmol/L，Na2HPO44.3mmol/L，KH2PO41.4mmol/L。2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠3g，柠檬酸0.4g。3）0.5mol/LEDTA缓冲液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10mmol/LNaOH调至pH...

三月二十日，来自中科院广州生物医药与健康研究院、武汉菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷泽大学的研究人员，在学术期刊《JournalofBioLogicalChemistry》发表学术论文，该研究检测了iPSC生成及随后基因校正过程中的基因组不稳定性，指出重编程和基因打靶可能会产生大量但却不同的基因组变化，因此，在iPSC诱导时及基因打靶之后，必须进行严格的基因组监控和选择。本文通讯作者是中科院生物医药与健康研究院研究员潘光锦博士，其2002年硕士毕业于...