如何检测大鼠脂肪酸合成酶（FAS）elisa试剂盒？

大鼠脂肪酸合成酶(FAS)elisa试剂盒基本信息

脂肪酸合成酶 fatty acid synthetase 乙酰CoA+7丙=酸CoA+14NADPH+14H+→棕榈酸+7CO2+8CoA+14NADP++6H2O。催化上述反应的酶称为脂肪酸合成酶，不过酵母酶的zui终产物是棕榈酸CoA。如图所示，在丙二酸基和乙酰基缩合时，在每次延长C2单位的同时发生还原反应，在这个复杂的反应中，各有相应的酶参与作用。而酰基以CoA转移到酰基载体蛋白（ACP）上，以与此蛋白质结合的形态进行反应。通过如图所示的反应反复进行可生成棕榈酸。在大肠杆菌中，各部分反应的酶以及ACP是不结合在一起的，但在动物和酵母中，各种酶是结合型，形成所谓多酶复合体。

大鼠脂肪酸合成酶(FAS)elisa试剂盒的检测技术 

双抗体夹心法

　　1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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