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大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)elisa试剂盒怎么检测

更新时间:2017-04-21      浏览次数:1017

大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)elisa试剂盒简介

    ICAM-1(intercellular cell adhesion molecule-1 即细胞间黏附分子-1),又叫做CD54,属于黏附分子中免疫球蛋白超家族(IGSF)中的成员,是介导黏附反应重要的一个黏附分子。ICAM-1 在静息的血管内皮细胞(VEC)上呈低水平表达,通过与血管内皮细胞表面上的特异性受体结合而发挥其生物学活性。作为白血球和内皮细胞跨膜的蛋白质,ICAM1在稳定细胞间相互作用和促进白血球和内皮细胞的迁移起到重要作用。ICAM-1 的受体有LFA-1(lymphocyte function associated antigen-1, 即淋巴细胞功能相关抗原-1)和Mac-1,均属于整合素家族。LFA-1是ICAM-1 的主要受体,而Mac-1与ICAM-1 的亲和力较低,纤维蛋白原也可成为ICAM-1 的配体之一。

大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)elisa试剂盒怎么检测

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

我司elisa试剂盒的优点

操作简单、快速、灵敏度高、特异性强、性价比高、样品所需量少

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