高效液相色谱法测定盐酸阿扑吗啡实验分析

高效液相色谱法测定盐酸阿扑吗啡实验分析

盐酸阿朴吗啡为白色或浅灰色的光泽结晶或结晶性粉末。能溶于水和乙醇，水溶液呈中性。无臭，置空气中遇光会变成绿色。

1　仪器与试药
　　日本岛津LC-10A型高效液相色谱仪，SPD-10A型检测器，C-R6A型色谱数据处理仪；盐酸阿扑吗啡对照品（湖北省医药工业研究所），乙腈（色谱纯），磷酸二氢钠和磷酸及盐酸（分析纯），盐酸阿扑吗啡舌下片（湖北省医药工业研究所，批号20000301,20000302,20000303）。
2　实验方法
2.1　色谱条件　色谱柱： Inertsil^ODS-3 C₁₈(4.6mm×150mm,5μm) ；流动相为乙腈-0.1mol/L磷酸二氢钠-磷酸（16∶84∶0.4），流速1.0ml/min；检测波长273nm；进样量20μl。
　　在上述色谱条件下，盐酸阿扑吗啡峰的保留时间为6.5min，色谱图见图1，按盐酸阿扑吗啡峰计算理论塔板数为7 500。

A对照品色谱图；B舌下片色谱图；C?空白辅料色谱图
图1　盐酸阿扑吗啡色谱图

2.2　线性关系　取经105℃干燥至恒重的盐酸阿扑吗啡对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸液（pH=1）制成0.4mg/ml的溶液，分别吸取0.5，1，2，3，4ml，用0.1mol/L盐酸液稀释至50ml。精密量取20μl注入液相色谱仪，色谱峰面积（A）与重量（W）在4.0～32.0μg/ml范围内线性关系良好，回归方程为A=1 956.8W+268.0，r=0.9998。
2.3　回收率测定　取经105℃干燥至恒重的盐酸阿扑吗啡对照品约20mg，精密称定，用0.1mol/L盐酸液溶解并稀释至50ml。精密量取10.0ml，置已按处方加入空白辅料的250ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸液稀释至刻度，照含量测定项下的方法测定，计算平均回收率和RSD。
2.4　精密度试验　取对照品溶液，重复进样6次，记录峰面积，计算RSD。
2.5　稳定性试验　取供试品溶液，分别于0，3，6，12，24h进样，记录峰面积，计算RSD。
2.6　含量测定　取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸阿扑吗啡4mg），置250ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取105℃干燥至恒重的盐酸阿扑吗啡对照品适量，加0.1mol/L盐酸液溶解并定量稀释成16μg/ml的溶液，作为对照品溶液。分别量取供试品溶液和对照品溶液各20μl进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。
　　含量均匀度（盐酸阿扑吗啡舌下片的规格是4mg）：取本品10片，分别置250ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，照含量测定项下的方法测定。

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