IgM类单克隆抗体纯化试剂盒现货供应

IgM类单克隆抗体纯化试剂盒使用说明书

                                                            立可纯C080202（50ML纯化量）

试剂原理：

本试剂盒利用不同类别免疫球蛋白结构特性，通过大量实验分析验证而得到的一个与传统纯化*不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重复性的单克隆抗体的纯化方法，本试剂盒所用材料对人体没有损害，安全环保。

试剂特点：

           本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯度。实验表明，本试剂盒可以得到95%左右纯度的抗体；并且由于配方考究，抗体在纯化过程中几乎没有损伤，*保持应有的活性，实际应用*。

适用范围：

         本试剂盒仅适用于小鼠IgM类单克隆抗体腹水的纯化，不能用于其它Ig类或亚类单克隆抗体腹水的纯化实验，如需要可选择立可纯系列其它货号的纯化试剂，它能为您带来满意结果。

试剂组成：

纯化步骤：

1、将单克隆抗体腹水从冰箱中取出，室温避光放置15分钟，然

后用凉水边冲边摇匀快速解冻。

2、将化开的单克隆抗体腹水12000RPM 4-37℃离心10-20分钟。

3、先吸弃zui上面浮沫和油脂，然后将上清转出到另一个干净容器或离心管；按每1毫升单克隆抗体腹水加入纯化液A 1.3毫升，室温避光倒转20分。

4、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，沉淀用纯化液B溶解到原单克隆抗体腹水1/2体积；再按每毫升加入纯化液C 1.2毫升，室温避光倒转10分钟。

5、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，弃沉淀收集上清；每1.1毫升上清液加纯化液D 1.2毫升，室温避光倒转20分钟。

6、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，收集沉淀用纯化液B收集溶解沉淀到原单克隆抗体腹水体积的1/2。

7、透析袋用PBST浸泡3-5分钟，然后用手揉捏数次，自来水冲净后接纯水冲洗干净，将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。

8、透析液用纯水稀释30倍，将要透析的抗体袋子放入。抗体体积：透析液体积=1:50，4℃搅拌透析每次1小时，共3-4次。

9、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，收集上清测蛋白浓度并调控在5mg/ml左右zui后加10/万NaN3防腐并除菌过滤4℃备用。

注意事项：

1、溶血和腐败的腹水不得用于纯化（血性腹水离心后除去红细胞等可正常纯化）。

2、离心温度不要超过37℃。

3、操作和量取试剂要细致。

4、不搅拌透析每次时间不得低于2小时。