上海信帆为大家提供：促肾上腺皮质素释放激素放免药盒说明书

促肾上腺皮质素释放激素放免药盒说明书
CRH RIA KIT
促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）由下丘脑神经元合成，能刺激垂体促肾上腺皮质细胞前
阿黑皮素原基因的表达和促肾上腺皮质激素及其相关肽的合成与释放。CRH 不仅在脑内分布广
泛，且人胎盘组织、羊膜、绒毛膜和蜕膜、大鼠胸腺和脾脏乃至植物血凝素刺激的人T 淋巴细
胞都可合成与分泌。人CRH 与大鼠CRH *同源，都为41 肽，与羊CRH 有7 个氨基酸残基
不同。
试剂盒组成与配制：
1、CRH 标准品6 瓶，其浓度分别为0、1.5、5.0、15.0、45.0、135.0ng/ml。
2、125I-CRH 1 瓶。
3、CRH 抗体1 瓶。
4、缓冲液一瓶。
5、分离剂(第二抗体)一瓶。
样本收集和提取：
1、静脉血3ml，注入含0.5M EDTA-Na230ul 的试管中，混匀，离心，取血浆测定。
如贮于－20℃2-3 月内测定不影响结果。
2、组织的提取：取大小适宜的组织块，立即称重后于煮沸的生理盐水（1ml）中煮
沸3 分钟，再加1Ｎ冰醋酸0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用1ＮNaOH 0.5ml 中
和，离心3000 转/分，30 分钟(是低温离心)。取上清液贮存于－20℃以下
待测样本可保留2-3 个月。
测定操作步骤：
CRH RIA 操作程序加样单位:ul
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试剂T NSB B0 S1-S8 标本
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缓冲液—— 200 —— —— ——
零标准—— —— 100 —— ——
标准液—— —— —— 100 ——
标本—— —— —— —— 100
抗体—— —— 100 100 100
125I-CRH 100 100 100 100 100
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混匀，4℃ 放置24 小时
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分离剂500 500 500 500 500
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混匀，室温放置15 分钟，3500 转/分离心15 分钟。弃上清，测沉淀计数(cpm)。
结果计算：
以N/T、B/T 计算NSB、S0 结合百分率，以B/B0 计算标准及待测物结合百分率，
在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
注意事项：
1、本月标准品每瓶用0.8 ml 缓冲液稀释
2、本月药盒抗体每瓶用5.0 ml 缓冲液稀释
3、本月药盒标记每瓶用5.5 ml 缓冲液稀释
药盒的技术指标：
1、灵敏度:≤ 3Pg/ml。
2、重复性:批内cv< 8％,批间cv<12％。
3、回收率:平均回收率88％。
4、正常参考值：5.1±2.1 ng/ml
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% 2.1 B0/T% 35 B/ B0 % 94 82 65 38 19
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