上海信帆提供：土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒说明书

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土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒（VW13, 50T/24S）说明书
测定意义：
土壤总磷包括有机磷和无机磷，其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解
而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷，可以全面反映土壤磷营养状况。
测定原理：
利用钼蓝法定磷。取一份土样，通过浸提法测定土壤无机磷含量；另外取一份土样，经高温
灼烧后，土壤有机磷转化为无机磷，测得土壤总磷含量；总磷含量减去无机磷含量，即可计
算出有机磷含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式水浴锅，分析天平、可调式移液器、550℃高温电炉，
1mL 玻璃比色皿、蒸馏水、100 目筛子（可更小）。

土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。临用前用蒸馏水稀释10 倍后再用。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入20 mL 蒸馏水，充分溶解后加入10 mL
试剂二，混匀。
标准品：液体×1 支，20 μ mol/L 无机磷标准品，4℃保存。
土壤不同形态磷提取：
1.无机磷：称取通过100 目筛子的风干土样0.1g，转移到10 mL 离心管，加入10mL 试剂一，
震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，离心10min，取上清液一，用于无机磷含量测
定。
2.总磷提取：取通过100 目筛子的风干土样，550℃灼烧1h，冷却后称取约0.1g，转移到10
mL 离心管，加入10mL 试剂一，震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，离心10min，
取上清液二，用于总磷含量测定。
测定步骤：
1. 分光光度计预热30 min 以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。
2.打开水浴锅，调节温度到40℃。
3. 空白管：取EP 管，依次加入500μL 蒸馏水，500μL 试剂三，混匀后置于40℃水浴保温
10min，室温冷却10 min 后于660 nm 测定吸光度，记为A 空白管。
4. 标准管：取EP 管，依次加入50μL 标准液，450μL 蒸馏水，500μL 试剂三，混匀后置于
40℃水浴保温10min，室温冷却10 min 后于660 nm 测定吸光度，记为A 标准管。
5. 测定管：取EP 管，依次加入50μL 上清液一或者上清液二，450μL 蒸馏水，500μL 试剂
三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min 后于660 nm 测定吸光度，记为A
测定管。
土壤磷含量计算：
1.土壤无机磷含量（μmol /g）=[C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V
总÷W=0.2×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W
C 标准液：20 μmol/L； W：土壤样品质量，g； V 总：上清液一总体积，10 mL=0.01 L。
2.土壤总磷含量（μmol /g）=[C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总
÷W=0.2×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W
C 标准液：20 μmol/L；V 标准液：50μL=0.05 mL；W：土壤样品质量，g；V 总：上清液二
总体积，10 mL=0.01 L。
3. 土壤有机磷（μmol /g）=土壤总磷-土壤无机磷

土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒