苯甲脒琼脂糖凝胶FF

苯甲脒琼脂糖凝胶FF

英文名称：Benzamidine-Berpharose FF

货号：B2782

规格：1ml

1.产品介绍

   苯甲脒-琼脂糖凝胶FF是一种将苯甲脒键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。苯甲脒类物质是丝-氨酸蛋白酶的广谱抑制剂，该产品保留了琼脂糖极-好的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，主要用于纯化胰蛋-白酶、尿激-酶和激肽-释放酶等丝-氨酸蛋白酶，可以从血清、细胞上清液和菌体裂解液中一步纯化样品。

2.规格

1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、20ml、100ml、500ml、1L 纯化流程

应用举例：

平衡缓冲液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4

结合缓冲液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4

洗脱缓冲液：10 mM HCl，0.5M NaCl，pH2.0 或50mM甘-氨酸，pH3.0

中和液: 1M Tris，pH8.5

竞争性洗脱液: 50mM Tris-HCl，20mM 4-氨基本甲脒0.5M NaCl，pH7.4

平衡：用3-5个柱体积的平衡缓冲溶液进行平衡，观察检测器的变化，直到电导率、   pH值等参数不变。

上样：样品的预处理，样品需至少用0.45μm滤膜过滤，在上样，以免堵塞层析柱。

上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可通过线性实验找到最佳上样量。

淋洗：用5-10个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗，观察检测器的变化，直到电导率、pH值等参数基本不变。

（4）洗脱：使用 5-10 倍柱体积的洗脱液，收集洗脱峰（部分洗脱方式需中和液中和）。

（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱体积的平衡缓冲液液和 5 倍柱体积的去离子水平衡填料，然后保存在等体积的保护液中，置于4-8 ℃保存。

5.在位清洗(CIP)：

填料可以重复使用无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

（1）去除一些沉淀或变性物质：用 2 倍柱体积的6M盐酸胍或8M尿素溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的去离子水清洗。

（2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质：用 3-4 倍柱体积的70%乙醇或2倍体积的1% Triton X-100 清洗，然后立即用5倍柱体积的去离子水清洗。

（3）去除一些离子键结合物质：用 3-4 倍柱体积的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的去离子水清洗。

注意事项：

（1）使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。

（2）本产品保存条件为50mM NaAc，pH4.0，20%乙醇，4-8℃。

（3）运输：4-25℃，常，,避光。

（4）仅供科研实验使用。

苯甲脒琼脂糖凝胶FF