伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶

伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶

英文名称：Con A Berpharose

货号：B2781

规格：5ml

1.产品介绍

   伴刀豆球蛋白A-琼脂糖凝胶是一种将伴刀豆球蛋白A（Con A)与键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。Con A是从巨豆中分离出来的一种植物血凝素，能与含有ɑ-D-吡喃甘露糖基、ɑ-D-吡喃葡萄糖基以及与其空间位置相关的分子基团的结合。Con A与糖类分子结合主要在C-3、C-4及C-6的羟基部分，Con A与D-吡喃甘露糖的结合比与D-吡喃葡萄糖要强些，主要用于分离和纯化一些糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、带甘露糖苷或葡糖苷残基的膜囊泡、lgM、激素脂蛋白等，例如人血清中胰蛋-白酶抑制剂、碱性磷酸酯酶、小牛脾磷酸二酯酶、不同变种的甲胎球蛋白和某些激素如绒毛膜促性-腺激素（HCG）、促黄体激素（LH）等物质都可以用它纯化。

2.规格

1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、20ml、100ml、500ml、1L 纯化流程

应用举例：

平衡缓冲液：20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

结合缓冲液：20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

（该填料如需在 pH 小于5.0下操作，必须Mn2+和Ca2+的存在时才具有吸附活性）

洗脱缓冲液： 20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、0.1M-0.2Mɑ-D-甲

基甘露糖苷（或ɑ-D-甲基葡萄糖苷）、pH7.4

（注：洗脱液中ɑ-D-甲基甘露糖苷或ɑ-D-甲基葡萄糖苷浓度可根据物质吸附能力进行线性或梯度洗脱。甘露糖和葡萄糖亦可以做洗脱物质，但洗脱能力较弱。结合能力较强的物质可采用降低洗脱液pH洗脱，但不要低于pH4.0。可采用硼酸盐作为洗脱液，如0.1M硼酸盐，pH6.5。）

平衡：用3-5个柱体积的平衡缓冲溶液进行平衡，观察检测器的变化，直到电导率、  

                       pH值等参数不变。

上样：样品的预处理，样品需至少用0.45μm滤膜过滤，在上样，以免堵塞层析柱。

                      上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可通过线性实验找到最佳

                       上样量。

淋洗：用5-10个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗，观察检测器的变化，直到电导率、pH

                      值等参数基本不变。

（4）洗脱：使用 5-10 倍柱体积的洗脱液，收集洗脱峰（部分洗脱方式需中和液中和）。

（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱体积的平衡缓冲液液和 5 倍柱体积的去离子水平衡填料，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于 4-8 ℃保存。

5.在位清洗(CIP)：

填料可以重复使用无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

用 3-4 倍柱体积的含有0.5M NaCl的pH8.5或pH4.5的缓冲液清洗，然后立即用5倍柱体积的结合液平衡。

去除结合力较强物质：用 2 倍柱体积的含1% Triton X-100，pH6.5的0.1M硼酸盐缓冲液清洗，或20%乙醇或50%乙二醇溶液清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。

6.注意事项：

（1）使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。

（2）本产品保存条件为20%乙醇，4-8℃。

（3）运输：4-25℃，常，,避光。

（4）仅供科研实验使用。

伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶