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免疫荧光实验代测服务

免疫荧光实验代测服务
服务项目:包埋→切片→免疫荧光(单标)→免疫荧光(双标)→抗体费用→全景扫描(单标)→全景扫描(双标)→免疫荧光分析
样本运输:常温运输(4%多聚甲醛固定,可加冰袋运输)
信帆生物提供各类实验代测,更多服务项目欢迎致电咨询,我们将竭诚为您服务!

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  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-21
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详细介绍

免疫荧光实验代测服务

兔疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。

免疫荧光实验说明:

1、确认要做的是单标还是双标.

2、免疫荧光拍照免费。

3、免疫荧光要做预实验。

4、全景扫描可看任意倍数。

 

冰冻切片荧光tunel+免疫荧光双标实验步骤

1、 冰冻切片固定:冰冻切片从冰箱拿出来复温,晾干水分,冷丙酮固定10min,待丙酮*干后于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。

2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K储存液用PBS 1:9稀释)覆盖组织,37度温箱孵育30min。将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。

3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min,将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。

4、 加试剂1,2:按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)2:29混合(试剂1,2为现配现用),加到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。

5、 BSA封闭:将玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min在圈内滴加3%BSA均匀覆盖组织,室温封闭30min

6、 加一抗:轻轻甩掉封闭液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)

7、 加二抗:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织,避光室温孵育50min。

8、 DAPI复染细胞核:PBSPH7.4洗涤3次,每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液,避光室温孵育10min。

9、封片:玻片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。

10、 镜检拍照:切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波长420nmFITC绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555 nmCY3红光激发波长510-560,发射波长590nm

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