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大鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒

大鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒

简要描述:

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中过氧化氢酶(CAT)含量。

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大鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒试剂盒组成

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(8 U/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12 孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂 A

6ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂 B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒操作步骤

1.    标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

4 U/L

5 号标准品

150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

2 U/L

4 号标准品

150μl 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

1 U/L

3 号标准品

150μl 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

0.5 U/L

2 号标准品

150μl 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

0.25 U/L

1 号标准品

150μl 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2.    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl, 然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.    温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.    配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6.    加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

7.    温育:操作同 3

8.    洗涤:操作同 5

9.    显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10.  终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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