C肽放射免疫实验代测

所有产品仅供科研使用，不能用于食用和医疗等

C肽放射免疫实验代测

通用名：碘[ 125I]人 C 肽放射免疫-分析药盒

汉语拼音：Dian [ 125I] Ren C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe

英文名：Iodine [ 125I] Human C–peptide Radioimmunoassay Kit

简称：碘[ 125I]- C-P 放免药盒 [使用目的] 用于科研血清样本中 C 肽(C-P)的定量测定

[用途] 1) 指导胰岛素治疗，对于胰岛素治疗的样本，C 肽测定可以确定是否继续使用胰岛素治 疗，还是用口服降糖药或饮食治疗。C 肽的测定值对糖尿病的治疗具有重要意义。 2) 对低血糖综合症的诊断。 3) 对胰岛移植和胰腺移植的样本，C 肽测定可以了解移植是否存活和 B 细胞的功能。 4) 同时测定 C 肽和胰岛素可了解肝病的变化，如肝硬化时，外周血 C 肽/胰岛素的比值下 降。 5) 对胰岛或胰腺肿瘤-治疗后复发和功能的诊断。

[试验原理] 本药盒采用竞争放射免疫分析法，通过二抗沉淀抗原-抗体免疫复合物来测定血清中 C 肽的含量，待测血清、标准品中的 C 肽和 125I-C–P 与有*的抗体竞争结合。125I-C–P 一 部分与抗体结合为复合物，另一部分游离。加入分离试剂，离心使复合物部分沉淀，与游离 部分分离，弃去上清液，测定沉淀物的放射性计数。待测血清和标准中的 C 肽含量与与复合 物的放射性强度呈负相关，用一系列不同浓度的 C 肽作标准，可获得标准曲线，从标准曲线 上可查出血清中 C 肽的含量。

[仪器] 1、 γ－计数器 2、 低温离心机 3、 恒温水浴箱 [样本要求] 110 微升科研血清样本。 采静脉血 5ml 于塑料试管中，静置使其凝固后，1500 转／分离心，取其上清液，放置玻 璃瓶中。如果样本不立即使用，可在-18℃~-25℃储存 6 个月。 严重溶血、高浓度的脂类、胆-红素对测定结果有影响。

[注意事项] 1) 收到分析试剂盒后，尽快存放在 2 – 8℃。 2) 由于 C 肽在溶液状态下极不稳定，所以先溶解标记物、抗体，待一切准备工作完毕后， 后溶解标准品。如果分析试剂盒一次用不完，要做若干次，那么把标准品溶解后尽快 分装成若干份，并立即存放在–20℃保存，避免反复冻融。C 肽标记物的分装、使用、 保存同标准品程序，避免反复冻融。 3) 在加分离试剂前，将分离试剂摇匀。 4) 分析试管放在 4℃温育时，好套上塑料袋，避免蒸发，保持一定的反应体积。

[实验方法] 1、 将实验所需试剂及样本放置室温，冻干品按操作要求进行溶解,平衡至少 30 分钟 以上才可进行操作； 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复； 3、 每个 NSB 管加入 200µl 温育液，每个标准品“0"管 加入 100µl 温育液； 4、 取每个浓度的标准品（A~F）、质控血清和样本 100µl 加入相应编号的试管中； 5、 每管均各加入 100µl 标记物工作液； 6、 除 T、NSB 管外，每管均各加入 100µl 抗体工作液，充分混匀； 7、 4℃温育 24 小时； 8、 每管均各加入 500µl 分离剂后，充分混匀； 9、 室温放置 15 分钟后，离心 3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液； 10、 用 γ-计数器测定每管 1 分钟的放射性强度计数； 11、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。

[实验过程中应注意] 1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％； 2、 加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染； 3、 如果某一个样本的测定值高于高浓度的标准品浓度，用零标准品以 1：2 或 1： 4 的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。

[质量控制] 每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果 的可靠性。 1、 质控血清的平均值应在允许范围内； 2、 曲线方程应采用佳拟合方式； 3、 重复样本的测定结果相差在 15％以内。 如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。

[测定结果的计算] 1、 计算标准品（A~F）、质控品和样品与标准品 0 的比值（B/B0）; 2、 剂量-反应曲线按“对数剂量-结合率对数"（Log(dose-Log(B/ B0))数学模型或 四参数数学模型拟合，通过每个标准品的 B/B0和其浓度建立标准曲线； 3、 从标准曲线上查出样本的浓度值，B/B0不在标准曲线之内的样本及其浓度

[实验的局限性] 1、 本品仅供体外诊断使用，只能用于科研血清样本的测定而不能用于其他体液样本； 2、 通过其它方法得到的 C-P 值与本品测定结果不具有直接的可比性；

C肽放射免疫实验代测