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大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒

简要描述:

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)含量。

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大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒

本试剂盒用双抗夹心法测标本中鼠谷胱肽过氧化(GPX)水平用纯化的 大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次 加入谷胱肽过氧物酶(GPX)再与 HRP 标记的胱甘肽过化物(GPX)抗体结形 成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB  HRP 酶的催化 下转化成并在酸作用下转成zui终黄色颜色的浅和样中的谷胱肽过氧化 物酶(GPX)呈正关。用标仪在 450nm 波长下测吸光度OD ,通过准曲线计算 样品中大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)浓度。

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒试剂盒组成

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1 

7

终止液

6ml×1 

2

酶标试剂

6ml×1 

8

标准品(96pmol/ml

0.5ml×1 

3

酶标包被板

12 孔×8 

9

标准品稀释液

1.5ml×1 

4

样品稀释液

6ml×1 

10

说明书

5

显色剂 A 

6ml×1 

11

封板膜

6

显色剂 B 

6ml×1/

12

密封袋

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒操作步骤

1. 标准品的本试剂提供原倍准品一用户可照下列表在小管中进行稀 释。

48 pmol/ml

号标准品

150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

24 pmol/ml

号标准品

150μl  号标准品加入 150μl 标准品稀释液

12 pmol/ml

号标准品

150μl  号标准品加入 150μl 标准品稀释液

pmol/ml

号标准品

150μl  号标准品加入 150μl 标准品稀释液

pmol/ml

号标准品

150μl  号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2.加样分别设(空白对孔不加品及酶试剂其余各操作相同标准孔、

待测样品在酶包被上标准品确加样 50μl待测样孔中先样品稀 40μl, 然后再加测样品 10μl(样品zui终稀释 5 。加样样品加酶标板底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10.  终止:每加终 50μl,终止反(此时色立转黄

11.  测定以空白调零450nm 波长依序测各孔的O 测定应加终止 液后 15 分钟以内进行。

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒计算

以标准物的浓度为横坐标,OD  值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标

准曲线的线回归程式将样 OD 值代入程式计算样品浓以稀释倍, 即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD  大于标准孔* O请先样品稀液稀释定倍后再测定计 算时请zui乘以总释倍数(×n×5

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10.  如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1.试剂保存2-8℃。

2.有效期:6 个月

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒

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