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G25快速脱盐柱 大分子蛋白脱盐
货号:B2795
规格:2ml
1.产品介绍
G25快速脱盐柱(琼葡糖凝胶G25 FF脱盐柱)是将葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶混合制作,再经高度交联制备而成。具有稳定性好、刚性好流速快、重复性好、分辨率高,颗粒均匀,没有非特异吸附,装填后体积不收缩等优点,取代传统的葡聚糖凝胶G25脱盐柱,G25离心型脱盐柱。
用途:用于多肽,蛋白,糖类等,快速脱盐,缓冲液交换、纯化等。
4.规格
2ml *1支、2ml *5支(填料体积为2ml/支、柱管总体积12ml)操作方法:
(采用本公司G25快速脱盐柱可以在4-8 min左右完成一次脱盐纯化)
(1)将预装柱顶端塞子取下,打开下端堵头,将保存液流出或用吸管吸出,至距填料上界面2-3mm处,停止流液。
(2)平衡:用3-10倍柱体积的平衡缓冲液进行平衡
(3)上样:将保存液溜掉至距填料上界面2-3mm处时,开始上样,上样液体积控制在填料体积10-20%,最多不超过30%(即上样量200-600ul)
(4)洗脱:加入平衡缓冲液进行洗脱,洗脱体积应控制在 1 倍柱体积内(即2ml内)
(5)柱子的清洗:用平衡液对柱子进行清洗,去除小分子
(6)保存:加入20%乙醇对柱子进行保存,待下次继续使用
7.使用建议
(1)上样前,样品需要充分溶解后离心或 0.45 um 滤膜过滤,防止堵塞层析柱。
(2)所有缓冲液需要脱气处理,避免柱床温度剧烈变化产生气泡。
(3)样品上样体积控制为 10%-20%倍柱体积,最高不超过 30%倍柱体积;样品体积越小,分辨率越高。
(4)洗脱体积应控制在 1 倍柱体积内,若有分离不彻-底情况,调节上样量或样品浓度。
(5)为降低生物分子与介质的非特异性吸附,应降低结合液的离子浓度,如 0.025 M NaCl,若避免出现 NaCl,建议使用挥发性缓冲液,如0.1 M 乙酸铵或0.1 M 碳酸氢胺。
(6)填料再生的办法可以用 0.5M NaOH+2M NaCl 洗3个柱床体积,然后用水清洗到 pH为中性,再用 20%乙醇洗 3 个床体积即可。如果有脂类物质,也可以用 70%乙醇加一些非离子表面活性剂清洗 5 个柱床体积,对于变性蛋白可以用 6M 盐酸胍溶液清洗 5 个柱床体积。
8.注意事项:
1)凝胶从冷室或冰箱中取出后最好在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2)本产品保存条件为20%乙醇,4-8℃。
G25快速脱盐柱 大分子蛋白脱盐