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易洗脱链霉亲和素琼脂
英文名称:Easy Elution Streptavidin-Berpharose FF
1.产品介绍
链霉亲和素琼脂糖凝胶FF(易洗脱型)是一种将链霉亲和素(ee)键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和层析分离介质,利用生-物素与链霉亲和素配体之间的相互作用分离纯化生物-素或生物-素化的抗原、抗体、核酸等物质。
本产品与普通的链霉亲和素-琼脂糖凝胶FF相比,优势在于可以在温和条件下解离洗脱生物-素化物质,而不必再使用变性条件洗脱,从而能够更好的保持纯化样本的活性,增加填料的使用寿命。
2.规格:1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml
3.储存温度:4-8℃
4.纯化流程
①缓冲液:
结合缓冲液:20mM NaH2PO4、 150mM NaCl、pH7.4
洗脱缓冲液: 1-5mM D-生物-素
②样品准备:
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45μm滤膜或高速离心去除不溶物。
③样品纯化:
(1)装柱、平衡:取适量的填料装入合适的层析柱中,用结合缓冲液平衡5个柱体积,建议流速为100cm/h。
(2)上样:将准备好的样品缓慢上柱,为保证样品与链霉亲和素充分结合,应控制好上样流速,建议流速为15-50cm/h。
(3)淋洗:上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上,或平衡至基线,洗去杂质,推荐流速为100cm/h。
(4)竞争性洗脱:用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,建议流速为100cm/h。
(5)清洗:洗脱后的柱子应用结合缓冲液平衡,并用20%乙醇保存柱子,于4-8度保存。
5.注意事项
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2) 去除一些沉淀或变性物质,建议使用下面的方法用2倍柱体积的0.1M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质3-4倍柱体积70%乙醇或2倍柱体积的1% TritonX-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。
3) 本产品保存条件为20%乙醇,4-8℃。
4) 2-25℃,常压,避光运输。
5) 仅供科研实验使用。
易洗脱链霉亲和素琼脂