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油红O染色实验代测

油红O染色实验代测

简要描述:

油红O染色实验代测
实验样本类型:冰冻切片/细胞
主要用途:观察组织内脂肪的含量和定位
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油红O染色实验代测

油红O染色简介:

油红O对脂滴的染色机制一般认为是物理学上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂质染色,即油红O先溶于60%异丙醇中,然后切片浸入油红O染液中时,油红O在组织脂质的溶解度较60%异丙醇中的溶解度高,所以在染色时油红O从60%异丙醇中转移入脂质中使脂滴显示红色。

油红O染色步骤(仅供参考):

1、 固定:将冰冻切片复温干燥10min;细胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。

2、 染色:入油红O工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油红O工作液37°染色1-2h。

3、 分化:75%酒精分化2s,水洗1min。

4、 复染细胞核:Harris苏木素复染1-2min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。

5、 封片:用纸巾吸去周边水分,甘油明胶封片。

染色结果:脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核蓝色。

注意事项:

1、油红O是对脂类物质进行染色,石蜡切片在处理过程中脂类物质无法保存,所以石蜡切片不能进行油红O染色。

2、油红O染液使用一段时间后,染出的脂滴颜色会偏黄,此时就需要更换染液。

3、油红染色时,动作要轻,因为脂滴易移位,并且在封片时应避免盖玻片滑动;

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