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AB-PAS染色实验代测

AB-PAS染色实验代测
实验样本类型:石蜡切片
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  • 更新时间:2023-03-22
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详细介绍

AB-PAS染色实验代测

AB-PAS染色简介:

某些细胞如胃肠的杯状细胞能分泌粘稠的分泌物,含有大量的糖称粘多糖。中性粘液物质含有氨基己糖和游离的己糖基,酸性粘液物质也含有氨基己糖并含有各种酸根。此方法先染阿利新蓝染酸性粘液物质为蓝色,并阻断酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物试剂二醛而着红色。只有中性粘液物质的乙二醇基被高碘酸生成二醛后与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物。

 

染色实验步骤(仅供参考):

1、切片脱蜡至水。

2、阿利新蓝染液浸染或滴染5-10min。稍水洗。

3、0.5%高碘酸水溶液氧化5-10min。

4、流水冲洗数分钟蒸馏水换洗两次。

5、雪夫试剂暗处浸染或滴染15~30min。

6、流水冲洗5-10min。  

7、苏木素复染核1min左右,盐酸酒精分化,氨水返蓝。

8、95%酒精I 5min-95%酒精II 5min-无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min脱水,二甲苯透明中性树胶封固。(一定要湿封,在组织上的二甲苯未挥发完组织变干之前封片,否则易出现黑色的结晶状物即空气结晶)。

染色结果:

糖原、中性粘液物质呈红色,酸性粘液物质呈蓝色,混合性粘液物质呈蓝紫色或紫蓝色,胞核呈蓝色。

注意事项:

1、高碘酸溶液为透明溶液,长时间染色如果没有带入杂质的话此溶液一直是透明的,所以无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏,只有定期更换,根据标本的多少1~2月更换一次。

2、雪夫试剂要放入冰箱保存,临用前半小时取出恢复至室温,用后又倒回原瓶内放冰箱保存;雪夫试剂出现淡红色就不能继续使用了。

3、如果没有要求,可以不染核,要染核的话染色一定要浅。因为酸性粘液物质着蓝色,如果核蓝色太深对比不明显。

4、一定要先染阿利新蓝后染PAS,否则蓝色着染少而浅结果不准确,原因是酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物试剂二醛与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物后再难跟阿利新蓝结合。

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