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PCR实验代测服务基线(baseline)通常是3-15个循环的荧光信号;同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线
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PCR实验代测服务
Real-time qPCR常见参数
基线(baseline)通常是3-15个循环的荧光信号
同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线
阈值(threshold)
自动设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍
手动设置:置于指数扩增期,刚好可以清楚地看到荧光信号明显增强
同一次反应中针对不同的基因可单独设置阈值,但对于同一个基因扩增一定要用同一个阈值。
Ct值:与起始浓度的对数成线性关系。
分析定量时候一般取Ct:15-35。太大或者太小都会导致定量的不准确。
Rn(Normalized reporter)是荧光报告基团的荧光发射强度与参比染料的荧光发射强度的比值。
△Rn:△Rn是Rn扣除基线后得到的标准化结果(△Rn=Rn-基线)。
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