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小鼠肾素(Renin)酶联免疫elisa试剂盒

小鼠肾素(Renin)酶联免疫elisa试剂盒

简要描述:

上海信帆生物科技有限公司提供的小鼠肾素(Renin)酶联免疫elisa试剂盒,本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中肾素(Renin)含量。

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小鼠肾素(Renin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。

使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中肾素(Renin)含量。
小鼠肾素(Renin)酶联免疫elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肾素(Renin)水平。用纯化的小鼠肾素
(Renin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肾素(Renin) ,
再与 HRP 标记的肾素(Renin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤
后加底物TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的
黄色。颜色的深浅和样品中的肾素(Renin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光
度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠肾素(Renin)浓度。  
小鼠肾素(Renin)酶联免疫分析试剂盒试剂盒组成  
1  30倍浓缩洗涤液  20ml×1瓶  7  终止液  6ml×1 瓶
2  酶标试剂  6ml×1瓶  8  标准品(480pg/ml)  0.5ml×1 瓶
3  酶标包被板  12 孔×8条  9  标准品稀释液  1.5ml×1 瓶
4  样品稀释液  6ml×1瓶  10  说明书  1 份
5  显色剂A 液  6ml×1瓶  11  封板膜  2 张    
6  显色剂B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个
标本要求  
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
240pg/ml  5 号标准品  150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
120pg/ml  4 号标准品  150µl的5 号标准品加入150µl标准品稀释液
60pg/ml  3 号标准品  150µl的4 号标准品加入150µl标准品稀释液
30pg/ml  2 号标准品  150µl的3 号标准品加入150µl标准品稀释液
15pg/ml  1 号标准品  150µl的2 号标准品加入150µl标准品稀释液
 
 
2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、
待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样50µl, 待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。      
4.  配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。
6.  加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。  
7.  温育:操作同3。
8.  洗涤:操作同5。
9.  显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。
小鼠肾素(Renin)酶联免疫elisa试剂盒
 
 
计算
    以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式, 将样品的OD值代入方程式, 计算出样品浓度, 再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。  
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值) ,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5) 。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
 

 
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