兔抗绵羊红细胞抗体 溶血素

兔抗绵羊红细胞抗体 溶血素

货号：B2880

规格：1ml*5支

成分：兔抗绵羊红细胞溶血素

效价：1:4000

保存：4-8℃（避光保存）

用途：科研、教学实验使用，如总补体溶血活性（CH50）检测、补体结合实验（cft）等

产品规格：1ml/支

注意事项：请穿戴实验服及一次性手套操作

血清总补体溶血活性（CH50）测定方法

一、原理

利用绵羊细胞与相应抗体（溶血素）结合成的复合物，可激活血清中的补体，导致红细胞溶解，当红细胞和溶血素量一定时，在规定反应的时间内，溶血程度与补体量及活性呈正相关。在接近50%溶血（CH50）时，二者之间近似直线关系，故以50%溶血作为最敏感的判断终点。以引起50%溶血所需的最小补体量为一个CH50U，可计算出待测血清中总的补体溶血活性，以CH50U/ml表示。

 本实验主要反映补体经典活化途径的溶血功能，其结果与补体C1～C9各组成分的量及活性均有关。

二、试剂及配制

1.缓冲-生理盐水：

（1）贮存液：

     Na2HPO4.12H2O        2.85g

     KH2PO4               0.27g  

     NaCl                17.00g

     蒸馏水定容至100ml，4℃保存备用

（2）应用液：5ml贮存液加95ml蒸馏水，再加10%硫-酸镁0.1ml，当日配制，12小时内使用。

2.2%绵羊红细胞：无菌采取绵羊血液，于等量Alsever液中可保存3周。用前以缓冲液洗3次，并配成2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标                准化。

3.溶血素：将绵羊红细胞溶血素（效价1:4000），用应用液做1:2000倍稀释（即1ml溶血素加1999ml应用液）。

4.待测血清：新鲜血液室温放置30min，再4℃放置60min，使血-块收缩，4℃离心（3000r/min）10min，取上清，-20℃保存。

三、操作步骤

试管法（改良Mayer法）

1.致敏羊红细胞：2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素（1:2000），混匀，置37℃水浴30min。

2.稀释血清：待测血清0.2ml，加应用液3.8ml，稀释度为1:20。

3.配制溶血标准管：全溶血管:2%绵羊红细胞2ml加8ml蒸馏水，混匀。50%溶血管:取全溶血管液2ml加缓冲液2ml。

4.按表所示，依次加各成分于试管中，混匀，置37℃水浴30min

兔抗绵羊红细胞抗体 溶血素